全面解析m⁶A修饰图谱
m⁶A是真核生物RNA中最常见的内部修饰之一，广泛参与RNA剪接、核输出、稳定性、降解及翻译调控。
作为连接RNA命运与蛋白质合成的重要调控层，m⁶A可通过不同识别蛋白影响mRNA稳定性、翻译起始和核糖体募集，进而改变mRNA的翻译效率和蛋白质表达。
因此，仅分析RNA表达量往往不足以解释最终的蛋白质表达变化，解析m⁶A修饰与翻译之间的关系，是理解转录后调控机制的重要方向。
新使生物在已有GLORI-seq 2.0/3.0技术服务的基础上，推出MeRIP-seq技术服务，并针对不同研究对象提供Poly(A)富集型和去rRNA富集型两种方案。
MeRIP-seq适用于全转录组m⁶A富集区域筛查及多组样本间的差异Peak分析；而GLORI-seq 2.0/3.0则可进一步实现m⁶A位点的单碱基定位与修饰水平绝对定量。
两种技术相互补充，共同构建从“区域发现”到“位点确认与定量”的多层次m⁶A检测体系。
进一步结合新使生物超高分辨率Ribo-seq、全景tRNA-seq等翻译组学技术，可从m⁶A富集区域、单碱基位点、修饰比例及翻译响应等多个层面，系统解析m⁶A修饰对RNA命运、密码子解码与蛋白质合成的调控机制。
MeRIP-seq又称m⁶A-seq，其基本原理是将RNA片段化后，利用m⁶A特异性抗体对含有m⁶A修饰的RNA片段进行免疫沉淀富集，同时保留未经免疫沉淀的Input RNA作为对照。随后分别进行高通量测序，通过比较IP与Input信号，在转录组范围内鉴定m⁶A富集区域。
RNA经提取与质控后，可根据研究对象选择Poly(A)富集或去rRNA方案。随后进行RNA片段化、m⁶A抗体免疫沉淀、IP与Input文库构建、高通量测序及生物信息分析。
通过m⁶A抗体富集含有修饰的RNA片段，并结合Input背景信号，可以在转录组范围内获得m⁶A Peak分布图谱。
RNA富集方式会直接影响MeRIP-seq所覆盖的RNA类型。针对不同研究目的，新使生物提供Poly(A)富集法和去rRNA法两种技术方案。
新使生物现已建立从m⁶A区域筛查到单碱基定位与定量分析的多层次技术体系。
| 比较项目 | MeRIP-seq | GLORI-seq 2.0/3.0 |
|---|---|---|
| 检测原理 | m⁶A抗体免疫富集 | 化学转化 |
| 是否依赖抗体 | 是 | 否 |
| 检测结果 | m⁶A富集区域 | 单碱基m⁶A位点 |
| 分辨率 | 区域级 | 单碱基级 |
| 修饰比例定量 | 不能直接绝对定量 | 可进行位点修饰水平绝对定量 |
| 适合场景 | 全局筛查、多组比较、差异Peak分析 | 精确定位、修饰比例分析、低起始量研究 |
| 方案类型 | Poly(A)富集或去rRNA | GLORI-seq 2.0/3.0 |
新使生物NeoRibo长期专注于翻译组学技术研发与应用，已构建覆盖核糖体翻译、tRNA解码、RNA修饰及Poly(A)尾调控等多个层面的技术体系，提供从整体翻译活性、基因翻译效率到密码子分辨率翻译行为的系统解决方案，全面解析转录后及翻译过程中的精细调控机制。
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