GLORI技术服务

单碱基分辨率m⁶A定位与绝对定量分析

m⁶A修饰与翻译调控

m⁶A是真核mRNA中最丰富的内部修饰之一,广泛参与RNA命运调控。近年来的研究表明,m⁶A不仅影响mRNA的稳定性、剪接与核输出等经典过程,更在蛋白质翻译层面发挥关键作用,例如调控翻译起始、影响核糖体加载以及参与uORF和非经典ORF的翻译调控等。

现有m⁶A检测技术的局限性

尽管m⁶A研究已得到广泛关注,但现有检测方法在仍存在明显局限,限制了其在机制研究中的深入应用。

分辨率不足
MeRIP‑seq等方法仅能提供区域性信号(约100‑200 nt),无法精确到单碱基分辨率
存在检测偏好性
依赖抗体或酶的检测策略易引入序列或结构偏好性(Bias),影响m⁶A位点识别的准确性与重复性
缺乏定量能力
多数方法仅能判断是否存在修饰,难以获得m⁶A修饰比例及其动态变化
低输入适配性差
对RNA起始量要求较高,难以应用微量样本
m⁶A检测技术对比
方法 分辨率 抗体依赖 定量能力 偏好性 适用场景
MeRIP‑seq 低(100‑200 nt) 初步筛选
miCLIP 单碱基 部分 精细定位
DART‑seq 有限 特定体系
Direct RNA‑seq 单碱基 有限 修饰探索
GLORI‑seq 单碱基 绝对定量 极低 全面研究
核心指标 GLORI‑seq 1.0 GLORI‑seq 2.0 GLORI‑seq 3.0
反应体系 分步反应(含G保护) 一步法反应 一步法反应
低丰度 RNA检测灵敏度
样本量 > 5 × 10⁵ cells (10 μg Total RNA) > 5 × 10⁴ cells (1 μg Total RNA) >5000 cells (100 ng Total RNA)
相比GLORI‑seq 1.0,GLORI‑seq 2.0显著降低RNA降解并提升检测灵敏度,GLORI‑seq 3.0进一步突破样本量限制,实现微量样本的稳定检测
技术优势

新使生物(NeoRibo)联合北京大学伊成器教授完成GLORI技术转化,推出GLORI-seq 2.0/3.0技术服务,实现稳定、高精度的m⁶A绝对定量分析

绝对定量能力
评估m⁶A修饰比例,支持动态变化分析
高灵敏度
提高低丰度转录本m⁶A检测能力
单碱基分辨率
实现m⁶A位点级精准定位
低起始量
适用于低输入样本及微量样本
极低偏好性
基于化学反应策略,避免抗体或酶引入的检测偏好性
项目分类

针对不同样本量及研究需求,我们提供2项细分技术服务方案:

常规量GLORI‑seq 2.0
通过优化反应体系,降低RNA降解风险并提升检测稳定性,适用于常规及低输入样本
微量GLORI‑seq 3.0
在2.0基础上引入新的建库策略,降低样本损失,实现超低输入条件下的稳定检测
应用场景
m⁶A定量分析:实现位点级修饰比例评估及动态变化研究
翻译调控研究:结合Ribo-seq解析m⁶A对翻译效率及非经典ORF的影响
疾病机制研究:用于解析m⁶A在肿瘤等疾病中的调控作用
低输入样本研究:适用于分选细胞及微量临床样本
平台优势

新使生物专业翻译组学平台,构建了覆盖RNA调控的翻译多组学技术体系:

高分辨率Ribo-seq: 解析核糖体占据与翻译动态
Polysome profiling: 评估翻译活性与mRNA分布状态
RNC-seq: 捕获核糖体结合RNA,反映翻译进行中的转录本
tRNA-seq: 解析翻译系统的解码能力
tsRNA-seq: 解析tRNA来源小RNA图谱
PAlso-seq: 解析poly(A)尾长度与组成,连接mRNA稳定性与翻译效率
GLORI-seq: m⁶A绝对定量检测,探究RNA修饰对翻译调控的影响
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